Бактериальное исследование мокроты. Анализ мокроты - показание, как правильно собрать и сдавать, расшифровка результатов и показатели нормы

Бактериологическое исследование мокроты позволяет обнаружить возбудителей заболеваний легких. Гнойный, кровянистый комочек мокроты растирают между двумя предметными стеклами. Высохшие мазки фиксируют на огне, затем один окрашивают по Граму (см. Грама метод окраски), другой по Цилю - Нельсену. Окраска по Граму позволяет обнаружить грамположительные микробы - капсульный пневмококк (рис. 17), ; грамотрицательные - капсульная диплобацилла Фридлендера (рис. 18), палочка Пфейффера (рис. 19) и др. Микобактерии туберкулеза ищут в мазке, окрашенном но Цилю - Нельсену. На мазок накладывают кусочек фильтровальной бумаги, равный по площади мазку, наливают на него фуксин Циля (1 г основного фуксина растирают в ступке с несколькими каплями глицерина, затем с 10 мл 96% спирта и приливают к 90 мл 5% раствора фенола) и нагревают на нежарком пламени до появления паров. Бумажку сбрасывают, мазок опускают в 5-10% раствор (или 3% раствор в спирте) до обесцвечивания, хорошо промывают водой, докрашивают 20-30 сек. 0,5% раствором метиленового синего и промывают водой. Красные микобактерии хорошо видны (при иммерсионной системе) на голубом фоне препарата (рис. 20). В случае ненахождения микобактерии туберкулеза в мазке прибегают к методу их накопления - флотации. 10-15 мл мокроты помещают в бутылку с покатыми плечиками емкостью 250 мл, добавляют двойной объем 0,5% раствора и встряхивают до полного растворения мокроты. Прибавляют 100 мл дистиллированной воды и 1 мл (ксилола, бензина), встряхивают 10- 15 мин., доливают воды до горлышка и оставляют на 1-2 часа. Образовавшийся сверху сливкообразный слой отсасывают пипеткой с баллончиком и наносят по каплям на подогретое стекло, каждый раз на предыдущую подсохшую каплю. Препарат фиксируют и красят по Цилю - Нельсену. При отрицательном результате прибегают к посеву мокроты (бактериологическое исследование) или прививке ее животному (биологическое исследование). Посевы мокроты используют также для определения чувствительности ее флоры к антибиотикам.

Химическое исследование . Реакция мокроты на лакмус, как правило, слабощелочная, кислой она может стать при разложении мокроты и при примешивании желудочного содержимого (кислая отрыжка, желудочно-бронхиальный свищ). Белок в мокроте происходит из воспалительного экссудата и из распада лейкоцитов. Его мало (следы) в слизистой мокроте, много (1-2%) в мокроте при пневмонии, еще больше при отеке легкого. Для его определения к мокроте прибавляют двойное количество 3% раствора уксусной кислоты, энергично взбалтывают, фильтруют и в фильтрате определяют белок одним из обычных способов (см. Моча). Учитывают трехкратное разведение.

Бактериоскопическое, бактериологическое и биологическое исследования . Изучение микробной флоры мокроты необходимо для уточнения диагноза и для правильного выбора метода лечения. Этой цели служат бактериоскопическое, бактериологическое и биологическое исследования. Бактериоскопическое исследование достигает цели при относительно большом содержании микробов в мокроте. Для приготовления препаратов гнойный комочек переносят на наружную треть предметного стекла, накрывают такой же частью другого предметного стекла и растирают между ними. Мазкам дают высохнуть, фиксируют трехкратным проведением через пламя газовой горелки и окрашивают, один по Граму (см. Грама метод окраски), другой по Цилю - Нельсену (см. Туберкулез, лабораторные исследования). Окраска по Граму позволяет выявить грамположительный капсульный пневмококк, грамотрицательную капсульную пневмобациллу Фридлендера, палочку Пфейфера (цветн. рис. 5, 6 и 8), стафилококк, стрептококк, палочку Венсана, спириллы, катаральный микрококк и др. При исследовании отмечают количество найденных в поле зрения бактерий (мало, умеренно, много) и преобладание какого-либо вида. Способом Циля - Нельсена окрашивают кислотоупорные микробы, главным образом микобактерии туберкулеза. Микобактерии при этой окраске получаются красного цвета и хорошо видны на голубом фоне (цветн. рис. 1).

Несколько больший процент микобактерий туберкулеза выявляют при помощи люминесцентной микроскопии (см.). Светящиеся микобактерии хорошо видны при исследовании мазка с сухим объективом Х40 при окуляре ХЮ. Мазки приготовляют и фиксируют, как обычно, затем заливают на 5-10 мин. раствором красителя (аурамин 1: 1000, акридин оранжевый, смесь аурамина и родамина), промывают водой, обесцвечивают 5 мин. солянокислым спиртом, опять промывают водой и обрабатывают
раствором кислого фуксина (кислый фуксин 1 г, уксусная кислота 1 мл, дистиллированная вода 500 мл) или метиленового синего, которые гасят свечение фона. Препарат рассматривают в ультрафиолетовом свете (цветн. рис. 2).

Для облегчения поисков микобактерий туберкулеза прибегают к методам накопления, из которых чаще применяют метод флотации. 10-15 мл мокроты помещают в эрленмейеровскую колбу или бутылку с покатыми плечиками емкостью 250 мл, добавляют равный объем 0,5% раствора едкого натра и встряхивают смесь до гомогенизации ее. Прибавляют 50 мл дистиллированной воды и 1 мл толуола (ксилола, бензина), встряхивают, снова добавляют воду до половины бутылки и встряхивают 10-15 мин., затем доливают воду до горлышка и оставляют на 1-2 часа. Образующийся сверху сливкообразный слой отсасывают пипеткой с баллончиком, наносят на подогретое предметное стекло, подсушивают, фиксируют и окрашивают по Цилю - Нельсену.

Бактериологическое исследование применяют для идентификации микробов, определения их лекарственной устойчивости, вирулентности и т. д. Мокроту засевают на соответствующие питательные среды - плотные (кровяной агар) или жидкие (сахарный бульон, среды Тароцци), полусинтетическую среду Школьниковой; (цветн. рис. 3 и 4). Выросшие на соответствующих питательных средах микробы идентифицируют, определяют их патогенность (в некоторых случаях) и лекарственную устойчивость, предварительно определяют лекарственную устойчивость всей флоры мокроты в целом. Это производят путем посева кусочков мокроты, предварительно отмытых физиологическим раствором, на поверхность кровяного агара в чашке Петри. На посев раскладывают стандартные антибактериальные бумажные диски. О чувствительности флоры судят по величине зоны задержки роста флоры вокруг диска. Затем производят окончательное определение устойчивости каждого выделенного из мокроты вида бактерий отдельно. Для этого 18-часовую бульонную культуру каждого вида бактерий (стафилококки, стрептококки, клебсиеллы и др.) засевают газоном на чашки Петри с кровяным агаром. На газон раскладывают стандартные бумажные диски с антибиотиками, прижимая их пинцетом к поверхности агара так, чтобы они плотно прикасались к агару всей поверхностью. Чашки оставляют при комнатной температуре на 1,5-2 часа; за это время происходит достаточная диффузия препарата из дисков в окружающие агаровые слои. Затем чашки Петри помещают в термостат при t°37° на 18-24 часа. Об устойчивости исследуемого штамма судят по зоне задержки роста бактерий вокруг дисков. При отсутствии зоны задержки штамм считают устойчивым. Если образуется зона 1,5-2 см в диаметре, штамм считают слабо чувствительным, а при зоне более 2 см - чувствительным к данному антибиотику.

О посеве мокроты на микобактерии туберкулеза см. Туберкулез легких, исследование мокроты на микобактерии туберкулеза; об определении их чувствительности к антибиотикам см. Туберкулез легких, лекарственная устойчивость микобактерий.

При биологическом исследовании мокроты заражают животных. В качестве диагностического этот метод вытесняется культуральными способами.

Алгоритм выполнения взятия мокроты для бактериологического исследования

Подготовка к процедуре:

1. Представиться пациенту, объяснить ход и цель процедуры

2.. Собирать мокроту только при кашле, а не при отхаркивании

1. Необходимо соблюдать правила личной гигиены до и после сбора мокроты
2. Проконтролировать чтобы вечером пациент почистил зубы, а утром прополоскал рот и глотку кипяченой водой непосредственно перед сбором.(при необходимости контроль этой процедуры осуществляет младший медицинский персонал)
3. Обработать руки гигиеническим способом, осушить.
4. Надеть перчатки, маску

Выполнение процедуры

1. Открыть крышку банки
2. Попросить пациента откашлять и собрать мокроту в стерильную банку в количестве не менее 5 мл. Вовремя забора м/с подает банку из-за спины больного.
3. Закрыть крышку

Окончание процедуры

1. Снять маску, перчатки, поместить в емкость для дезинфекции
2. Обработать руки гигиеническим способом, осушить
3. Оформить направление
4. Сделать соответствующую запись о результатах выполнения в медицинскую документацию

Организовать доставку анализа в лабораторию

Дополнительные сведения об особенностях выполнения методики

Следить, чтобы мокрота не попала на край банки и не касаться внутренней поверхности крышки и банки

Исследуется свежевыделенная мокрота не позднее 1-1,5 часов

В бактериологическую лабораторию мокроту доставляют в герметичном контейнере.

Форма информированного согласия пациента при выполнении методики и дополнительная информация для пациента и членов его семьи

1. При поступлении в стационар пациент подписывает добровольное информированное согласие на медицинское вмешательство (на основе ст.32, 33 «Основ Законодательства РФ об охране здоровья граждан» приказ от 29.03.2011 № 101);
2. Лечение в стационаре, пациенту может проводиться по решению суда.

3. Пациент должен быть информирован о предстоящем исследовании. Информация о взятии мокроты на бактериологическое исследование, сообщаемая ему медицинским работником, включает сведения о цели данного исследования. Письменного подтверждения согласия пациента или его родственников на взятие мокроты на бактериологическое исследование не требуется, так как данный диагностический метод не является потенциально опасным для жизни и здоровья пациента

Параметры оценки и контроля качества выполнения методики

— Наличие записи о результатах выполнения назначения в медицинской документации.

— Своевременность выполнения процедуры(в соответствии со временем назначения).

— Отсутствие осложнений.

— Отсутствуют отклонения от алгоритма выполнения

— Удовлетворенность пациента качеством предоставленной медицинской услуги

Оснащение.

Ф.И.О. пациента,

адрес или № истории болезни,

дата направления на исследование.

2. Стерильная, широкогорлая банка с крышкой из крафт- бумаги, берется в

бактериологической лаборатории.

Методика взятия мокроты.

1. Собирают мокроту утром до еды.
2. Вечером и за 1,5 – 2 часа до исследования почистить зубы.
3. Непосредственно перед исследованием прополоскать рот и глотку кипяченой водой.
4. Объяснить больному, что во время сбора мокроты он не должен касаться краев стерильной посуды руками, ртом. Не касаться внутренней поверхности крышки. А после откашливания сразу закрыть банку крышкой.
5. Откашлять и собрать мокроту. Не менее 5 мл.
6. Доставить в лабораторию не позднее 1 – 1,5 часов после сбора.

Диагностическое значение.

Выявляют возбудителя патологического процесса (делают посев на питательные среды), а так же можно произвести подбор антибиотика эффективного при данном возбудителе (то есть определить чувствительность возбудителя к тому или иному антибиотику).

Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза методом флотации.

Оснащение.

Ф.И.О. пациента,

адрес или № истории болезни,

дата направления на исследование

2. Чистая стеклянная широкогорлая банка из темного стекла с завинчивающейся крышкой

(так как на свету микобактерии туберкулеза гибнут)

Методика сбора мокроты.

1. Мокрота собирается в течение суток.
2. Если мокрота отходит в малом количестве, то сбор происходит в течение 3 суток. Плевательница в этом случае хранится в прохладном, темном, сухом месте.
3. Для достоверного анализа необходимо 15 – 20 мл мокроты.
4. Предупредить, что мокрота собирается только при откашливании, а не при отхаркивании.
5. Необходимо соблюдать правила личной гигиены до и после сбора мокроты.

Диагностическое значение.

Выявление в мокроте возбудителя туберкулеза – микобактерия туберкулеза.

Сбор мокроты на атипичные клетки.

Подготовка пациента и правила сбора такие же, как для общего клинического анализа.

Н О! Исследуется свежевыделенная мокрота, так как атипичные клетки быстро разрушаются.

Иногда применяют предварительные ингаляции с протеолитическим ферментом трипсином, способствующим выхождению мокроты из наиболее глубоких отделов бронхиального дерева.

Бронхоскопия.

Бронхоскопия – метод осмотра бронхов с помощью специального прибора бронхофиброскопа.

Цели процедуры:

1. Диагностика.

Визуально осмотрев слизистую бронхов крупного и среднего калибра, можно обнаружить эрозии, язвы, воспалительные изменения, новообразования.

С помощью специальных щипчиков можно взять кусочек тканей из подозрительного места

для цитологического и гистологического исследования

1. Лечебная.

Можно извлечь инородное тело, удалить полипы. Можно извлечь гнойную, вязкую мокроту, а так же ввести в полость бронха антибиотики и другие лекарственные вещества.

Цели подготовки :

1. Информировать пациента о предстоящей процедуре и получить его согласие.
2. Подготовить необходимое оснащение для обеспечения четкого выполнения исследования.

Оснащение:

1. Бронхоскоп
2. Резиновые перчатки
3. Шприцы 10 и 20 мл
4. Раствор анестетика (новокаин 1%, тримекаин 5%, лидокаин 2%)
5. Раствор атропина 0,1%
6. Раствор димедрола 1%
7. Направление на исследование
8. Набор для помощи при анафилактическом шоке

Информация для пациента по подготовке к исследованию.

1. В доступной форме предоставить пациенту или его родственникам информацию о сути и целях предстоящего исследования. Получить согласие.
2. Предупредить пациента, что в день исследования нельзя есть, пить, курить.
3. Накануне вечером по назначению врача провести премедикацию транквилизаторами.
4. Непосредственно перед исследованием предложить пациенту опорожнить мочевой пузырь.
5. Придти в эндоскопический кабинет с полотенцем и направлением в назначенное время.

Методика проведения исследования:

1. Непосредственно перед исследованием, за 15 мин, по назначению врача ввести пациенту подкожно 0,1% 1 мл аптропина, 1% 1 мл димедрола.
2. Надеть стерильные перчатки.
3. Попросить пациента сесть на стул, слегка запрокинув голову.
4. Провести анестезию верхних дыхательных путей.
5. Ассистировать врачу при проведении бронхоскопии.
6. После окончания процедуры сбросить перчатки и отработанные инструменты в дезраствор.
7. Проводить пациента в палату, предупредить о необходимости не принимать пищу и не курить в течение 2 часов после исследования.

Постуральный дренаж.

Это использование определенного положения тела – специальные «дренажные» позы и упражнения с форсированным удлиненным выдохом для улучшения отхождения мокроты.

Противопоказания:

1. Кровохарканье.
2. Возникновение во время процедуры значительной одышки или приступа удушья.
3. Повышение артериального давления.
4. Головокружение.
5. Аритмии.

Алгоритм действия:

1. Объяснить пациенту смысл и цели процедуры.
2. Получить его согласие.
3. Приготовить плевательницу.
4. Придать одно из дренажных положений.
5. Наблюдать за состоянием пациента и правильностью выполнения процедуры.
6. Повторить процедуру 3 – 5 раз с перерывами в 10 – 15 минут.
7. Придать пациенту обычное положение в постели.
8. Провести дезинфекцию мокроты и плевательницы.
9. Протоколирование о выполненной процедуре в сестринской карте.

Методика выполнения процедуры:

1. Упражнения выполняются 2 раза в день – утром и вечером.
2. Предварительно принимают отхаркивающие средства – настой термопсиса, багульника, мать-и-мачехи.
3. Через 20 – 30 минут после этого больной поочередно занимает дренажные положения (смотри ниже).
4. В каждом положении больной выполняет вначале 4 – 5 глубоких медленных дыхательных движений, вдыхая воздух через нос, а выдыхая через сжатые губы. Затем после медленного глубокого вдоха производится форсированный выдох с настойчивым покашливанием 3 – 5 раз.

Хороший результат достигается при сочетании дренажных положений с различными методами вибрации грудной клетки.

А. Лежа в кровати больной поворачивается вокруг продольной оси своего тела и в промежуточных положениях (45˚) делает форсированные выдохи. Необходимо совершить полный оборот на 360˚.

Мокрота – это патологические выделения, которые образуются при воспалении дыхательных путей. Общий анализ мокроты помогает определить характер бронхолегочного заболевания, а в некоторых случаях и установить его причины.

Зачем нужно исследование?

Помимо , которая в норме вырабатывается в бронхах, мокрота содержит патогенные микроорганизмы, гной, клетки крови и частички отмерших клеток. Подробный анализ субстанции позволяет:

• выявить возбудителя патологии,
• подобрать рациональную антибиотикотерапию,
• подтвердить или опровергнуть наличие злокачественных опухолей,
• получить информацию о стадии и локализации воспалительного процесса.

Когда и кому назначается?

Основаниями для назначения анализа служат:

• подозрения на острые или хронические заболевания дыхательной системы ( , рак легкого и др.),
• необходимость контроля за эффективностью проводимой терапии.

Как подготовиться к анализу?

Чтобы легче отходила мокрота, накануне исследования пациенту рекомендуют пить побольше простой воды.

Мокрота лучше отходит, если накануне пить больше теплой жидкости и принимать отхаркивающие средства. Непосредственно перед исследованием необходимо тщательно почистить зубы и прополоскать рот, чтобы к мокроте не примешалась посторонняя бактериальная флора. Специальные средства для полоскания рта использовать не нужно.

Как сдавать мокроту?

Мокроту собирают дома или в амбулаторных условиях. Для этого пациенту выдают стерильную баночку, которую нельзя открывать до начала анализа.

Мокрота для исследования требуется утренняя, свежая. Собирать ее лучше до завтрака. Секрет выкашливают, но не отхаркивают.

Чтобы улучшить выделение мокроты, перед сбором необходимо сделать 3 медленных глубоких вдоха и выдоха, задерживая между ними дыхание на 3–5 секунд. После этого следует прокашляться и сплюнуть мокроту в баночку. Действия повторяют до тех пор, пока уровень секрета не достигнет отметки в 5 мл. Во время сбора важно следить, чтобы в контейнер не попадала слюна.

При неудачных попытках в домашних условиях можно подышать паром над кастрюлей с кипящей водой. В поликлинике пациентам делают 15-минутную ингаляцию с раствором соли и соды.

Когда нужно доставить материал в лабораторию?

Мокроту следует отвезти в лабораторию сразу после сбора. В несвежей субстанции начинают размножаться сапрофиты, что приводит к искажению результатов анализа. При необходимости баночку можно хранить в холодильнике, но не более 3 часов. В лабораториях для более длительного хранения применяют специальные консервирующие средства.

Расшифровка результатов

Исследование мокроты включает:

• визуальный осмотр (оценку цвета, характера, консистенции, слоистости),
• изучение под микроскопом,
• бактериоскопию и посев на питательные среды.

Результаты заносятся в бланк анализа, который в течение 3 рабочих дней выдается на руки пациенту или передается лечащему врачу. Специалист оценивает полученные данные и делает выводы о характере патологии.

Оценка макроскопических показателей мокроты:

Показатель	Данные анализа	На что указывают
Цвет Важно! На цвет мокроты может повлиять прием вина, кофе и некоторых лекарственных препаратов. Указывается конкретный состав бактериальной флоры, обнаруженной в мазках мокроты (стафилококки, стрептококки, диплобациллы и прочие). Особенности проведения анализа на туберкулез Кашель, который продолжается более трех недель, является прямым показанием к троекратному исследованию мокроты на туберкулез. При подозрении на туберкулез мокроту для исследования собирают 3 раза в присутствии медицинского персонала (в амбулаторных или стационарных условиях): Первый раз – с утра натощак. Второй – через 4 часа после первой пробы. Третий – на следующий день. Если пациент не может самостоятельно посетить медицинское учреждение, мокроту у него дома забирает медсестра, после чего сразу доставляет ее в лабораторию. При выявлении микобактерий туберкулеза (бактерий Коха) в результатах бактериоскопического исследования напротив строки «БК» проставляется значок «+». Это значит, что пациент болеет открытой формой заболевания и распространяет возбудителя в окружающую среду. В процессе лечения туберкулеза анализ мокроты периодически повторяют, чтобы оценить, насколько эффективно действует подобранная терапия.

Сбор мокроты для бактериологического исследования применяю! в клинической практике для установления этиологии гнойно-вос палительных заболеваний нижних дыхательных путей (пневмония бронхит, плеврит, бронхоэктатическая болезнь, абсцесс легкого и др.) Своевременная идентификация инфекционного возбудителя очень важна и для правильного выбора антибактериального препарата для лечения больного.

Во *буди гелями гнойно-воспалительных процессов НИЖНИХДЫХс! тельных путей могут быть бактерии, микоплазмы, риккетсии, грибы и простейшие. Наиболее частыми возбудителями среди бактерии являются Staphylococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae и др.

Для бактериологического исследования мокроту следует собираи. до начала антибактериальной терапии или после введения препарл та через определенный промежуток времени, необходимый для его выведения из организма больного (перед введением очередной доил препарата). Собирают утреннюю порцию мокроты и немедленно отправляют в лабораторию. Можно хранить мокроту до отправки и лабораторию в холодильнике при 4 °С не более 2--3 ч.

Бактериологическое исследование мокроты включает приготои ление и бактериоскопию мазка мокроты и бактериологический пости для получения чистой культуры.

Окраска мазка мокроты по Г раму - наиболее распространенный метод окраски всех видов материала, полученного от больного i заболеванием нижних дыхательных путей (мокрота, бронхоальвсо лярныи смыв и др.), для быстрого и ориентировочного установления инфекционного агента. С помощью бактериоскопии мазка мокроты окрашенного по I раму, проводят предваритетьпую оценку возможно го этиологического агенга. Мазок мокроты исследуют до посева се на цитательныесреды также ис цельюоценки пригодности для культивп рования и идентификации вероятного возбудителя. Мокроту считаю! пригодной, если в мазке, окрашенном по Граму, при малом увелич нии микроскопа обнаруживают более 25 лейкоцитов и менее lO эпи телиальных клеток в поле зрения.

Признаками качественного образна мокроты, который можно использовать для культивирования, явля ются преобладание в ней лейкоцитов над эпителиальными клетками а также наличие бактерий одного вита, которые располагаются внут­ри лейкоцитов или вокруг них. Грамположительные бактерии в пре­парате имеют темно-синюю окраску, грамотринательные - розовую. Возбудители атипичных пневмоний (микоплазмы, легиопелты, рик­кетсии и хламидии) не окрашиваются по Граму, поэтому для их выяв­ления в основном используются серологические методы.

Посев мокроты производят на питательные среды, которые инку­бируют при 37 °С в течение 18-24 ч. Из выросших колоний выделяют чистую купьтуруПидентифицируюг бактерии и определяют чувстви­тельность к антибактериальным препаратам.

Окраску мазков мокроты но Цилю-Нильсену используют для идентификации кислотоусгойчивых бацилл, в первую очередь мико­бактерий туберкулеза. Препарат готовят из гнойных частиц мокроты, которые выбирают из 4-6 разных мест. Отобранные частицы тща­тельно растирают между 2 предметными стеклами до гомогенной массы. Высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем горел­ки. Микобактерии туберкулеза окрашиваются в красный цвет, все остальные элементы мокроты и бактерии - в синий. Микобактерии туберкулеза имеют вид тонких, слегка изогнутых палочек различноп длины, с утолшениями на концах или посередине, расположенных группами и поодиночке. Обнаружение микобактерий туберкуле­за является наиболее достоверным признаком туберкулеза легких Метод окраски мазков по Цилю-Нильсену при активных формах туберкулеза легких обладает чувствительностью 50% и специфичнос­тью 80-85%.

Бактериологический посев мокроты на микобактерии туберкулеза используют для подтверждения этиологии заболевания легких. Эго достаточно длительное исследование, так как микобактерии растут медленно, поэтому окончательный результат бактериологического исследования лаборатория выдает примерно через 45 дней.

← Вернуться