Владельцы патента RU 2404254:
Изобретение относится к выявлению госпитальных штаммов микроорганизмов в лечебно-профилактических учреждениях и проведению соответствующих противоэпидемических мероприятий в них. Способ включает определение генотипических характеристик вирулентности исследуемых штаммов и сопоставление их с генотипическими характеристиками вирулентности штаммов, выделенных в лечебно-профилактическом учреждении от больных и окружающих предметов. Штаммы относят к госпитальным при соответствии генотипической характеристики вирулентности исследуемых штаммов генотипическим характеристикам вирулентности хотя бы одного из штаммов, выделенных в лечебно-профилактическом учреждении от больных и окружающих предметов. Использование способа упрощает выявление госпитальных штаммов и позволяет сократить время выявления госпитальных штаммов. 1 табл.
Изобретение относится к области медицины, а именно к эпидемиологии, и может быть использовано для выявления циркуляции госпитальных штаммов и для проведения противоэпидемических мероприятий в лечебно-профилактических учреждениях (ЛПУ).
Актуальность проблемы внутрибольничных инфекций определяется широким распространением их в медицинских учреждениях различного профиля и значительным ущербом, наносимым этими заболеваниями здоровью населения .
Для выявления циркуляции госпитальных штаммов в микробиологической практике используют методы эпидемиологического маркирования, суть которых состоит в том, что выделенные культуры идентифицируют до рода и вида, а затем проводят внутривидовую идентификацию с целью установления биовара, серовара, эковара, устойчивости к антибактериальным веществам, генотипа . Предлагаемые методы требуют значительных материальных затрат и длительного времени на проведение лабораторных исследований.
Известен способ выявления госпитальных штаммов по определению чувствительности штаммов к антибиотикам, составлению антибиотикограмм и сопоставлению антибиотикограмм культур бактерий, выделенных от больных и из окружающей среды .
Недостатком предложенного способа является недостаточная специфичность ввиду широкого распространения устойчивости к антибиотикам, в том числе у негоспитальных штаммов возбудителей, а также сложность интерпретации результатов ввиду высокой степени гетерогенности госпитальной популяции возбудителя по устойчивости к антибиотикам.
Известен способ идентификации госпитальных штаммов, включающий в себя определение биоритмов бактерий, выделенных от больных, и сравнение полученных биоритмов с биоритмами эталонных негоспитальных штаммов данного вида бактерий . Анализ биоритмов проводят по периоду репродуктивной активности бактерий, частоте ритма, мезору, амплитуде репродуктивной активности бактерий и акрофазе. При несовпадении биоритмов выделенного штамма бактерий с биоритмами эталонного негоспитального штамма выделенный штамм относят к госпитальному.
К недостаткам данного способа относится сложность интерпретации результатов, низкая специфичность ввиду значительного разнообразия госпитальных и негоспитальных генотипов, обладающих различными биоритмами. Кроме того, при осуществлении данного способа требуется круглосуточная работа врача-микробиолога, проводящего измерения через 8, 12, и 24 часа от начала исследований.
В качестве прототипа по наиболее близкой технической сущности нами выбран способ диагностики госпитального штамма синегнойной палочки PSEUDOMONAS AERUGIOSA, включающий определение чувствительности штамма к антибиотикам, его фаготипа и серотипа, устойчивости к дезинфицирующим веществам, плазмидного профиля, коэффициента адгезии к эпителиальным клеткам, штамм PSEUDOMONAS AERUGIOSA диагностируют как госпитальный при отсутствии его чувствительности к девяти и более антибиотикам, одинаковом фагосеротипе, устойчивости к пяти дезинфицирующим веществам, сходном плазмидном профиле и коэффициенте адгезии 15±0,2 и более .
К недостаткам способа, принятого за прототип, относится то, что способ является трудоемким и длительным, так как требует определения многих характеристик исследуемых штаммов, до получения окончательного результата исследования необходимо 10-15 дней. Выполнение способа требует также значительных материальных затрат.
Техническим результатом изобретения является упрощение способа выявления госпитальных штаммов и сокращение времени его проведения.
Указанный технический результат достигается тем, что определяют генотипические характеристики вирулентности исследуемых штаммов и сопоставляют их с генотипическими характеристиками вирулентности штаммов, выделенных в лечебно-профилактическом учреждении от больных и окружающих предметов. Штаммы относят к госпитальным при соответствии генотипической характеристики вирулентности исследуемых штаммов генотипическим характеристикам вирулентности хотя бы одного из штаммов, выделенных в лечебно-профилактическом учреждении от больных и окружающих предметов.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.
Проводят видовую идентификацию выделенной культуры, выделяют ДНК и определяют методом полимеразно-цепной реакции или любым другим экспресс-методом наличие нуклеотидных последовательностей, соответствующих участкам генов факторов патогенности, наиболее типичных для клинически значимых изолятов данного вида.
На основании наличия тех или иных генов определяют генотипические характеристики вирулентности или патовары исследуемых штаммов и сопоставляют их с генотипическими характеристиками вирулентности или патоварами штаммов, выделенных в лечебно-профилактическом учреждении от больных и окружающих предметов и имеющих предполагаемую эпидемиологическую связь с исследуемыми штаммами. Штамм относят к госпитальным при соответствии генотипической характеристики вирулентности исследуемых штаммов генотипическим характеристикам вирулентности хотя бы одного из штаммов, выделенных от больных и окружающих предметов в лечебно-профилактическом учреждении.
Отличительными существенными признаками заявляемого способа является:
Определение генотипических характеристик вирулентности исследуемых штаммов и их сопоставление с генотипическими характеристиками вирулентности штаммов, выделенных в лечебно-профилактическом учреждении от больных и окружающих предметов;
Отнесение штамма к госпитальным при соответствии генотипической характеристики вирулентности исследуемых штаммов генотипическим характеристикам вирулентности хотя бы одного из штаммов, выделенных от больных и окружающих предметов в лечебно-профилактическом учреждении.
Причинно-следственная связь между отличительными существенными признаками и достигаемым результатом
Выбор данных генотипических характеристик в качестве основных отличительных признаков заявляемого изобретения основан на обоснованном авторами теоретическом положении о том, что именно вирулентность является основной характеристикой госпитального штамма. Так, например, отмечено возрастание уровня вирулентности в процессе формирования госпитального штамма синегнойной палочки в урологическом стационаре , Serratia marcesens в отделении реанимации новорожденных . При этом другие биологические характеристики госпитальных штаммов, такие как устойчивость к антибиотикам, являются второстепенными. Показано, в частности, что множественная устойчивость к антибактериальным препаратам может быть в равной степени свойственна как госпитальным, так и негоспитальным штаммам энтерококков . Таким образом, с нашей точки зрения, методы выявления госпитальных штаммов, основанные на определении антибиотикограмм, не являются достаточно специфичными и требуют обязательного потверждения с использованием других методов внутривидового типирования. В то же время известно, что госпитальные популяции возбудителей внутрибольничных инфекций отличаются от негоспитальных содержанием большего количества генов факторов патогенности, обуславливающих повышенную вирулентность . При этом эпидемиологически связанные культуры будут обладать одним и тем же набором факторов патогенности, представляя собой один штамм. Данное обстоятельство позволяет использовать наличие генов факторов патогенности (хотя бы одного, т.к. штаммы, не обладающие ими, не имеют клинического и эпидемического значения) и их сочетание (т.е. генотипическую характеристику вирулентности) в качестве отличительного признака госпитального штамма при условии, что другие штаммы, выделенные в лечебно-профилактическом учреждении, имеют сходную генотипическую характеристику, т.е. имеются доказательства их эпидемиологической связи.
Таким образом, использование заявляемого нами способа позволяет в кратчайшие сроки выявить основные неотъемлемые свойства госпитального штамма (вирулентность и определяющие ее генетические детерминанты) и идентифицировать на основании наличия этих свойств госпитальный штамм.
Совокупность отличительных существенных признаков является новой и позволяет, в отличие от прототипа, упростить способ выявления госпитальных штаммов и сократить время его проведения.
Примеры использования способа
В процессе эпидемиологического наблюдения в гинекологическом стационаре осуществляли определение генетических характеристик штаммов Enterococcus spp. по заявляемому способу с помощью полимеразно-цепной реакции (ПЦР) по 5 генам вирулентности - gelE, sprE, fsrB, esp u asal. Для выделения ДНК штаммы энтерококков выращивались в триптозо-соевом бульоне ("BioMerieux"), после чего ДНК выделялась методом экспресс-ПЦР.
ПЦР проводили, начиная с предварительной инкубации проб при 94°С в течение 2 мин, а затем в течение 30 циклов при следующих условиях: денатурация (94°С) - 30 сек, отжиг (47°С-65°С, в зависимости от Г-Ц состава праймеров) - 60 сек, синтез (72°С) - 60 сек, конечный синтез 10 мин при 72°С. Для амплификации были использованы праймеры, приведенные в таблице. Эксперимент выполняли на приборе MJ Research.
Результаты ПЦР оценивались после электрофореза в 1% агарозном геле в ультафиолетовом освещении.
В процессе эпидемиологического наблюдения в гинекологическом стационаре было выявлено, что у больной Л., поступившей 09.07.2005 года с диагнозом метроэндометрит (и/б №25230), на пятые сутки пребывания в отделении был выделен Е. faecium №429. На основании определения генов вирулентности данный штамм был отнесен к генотипу 2 (присутствие гена esp при отсутствии генов gelE, sprE, fsrB, asal). В тот же день этот возбудитель соответствующего генотипа был выделен из смыва с перчаток (штамм 138 вс). При эпидемиологическом обследовании выявлено, что 11.07.05 г. при осмотре больной Л. из заднего свода влагалища и цервикального канала был выделен штамм №421, сходный по генотипическим характеристикам с вышеуказанными штаммами.
В данном случае фактором передачи могли служить считающиеся стерильными перчатки, взятые для осмотра из общего бикса, который был уже вскрыт.
Таким образом, культуры №421, 429 и 138 вс имели одинаковую генотипическую характеристику, ген фактора патогенности esp и имели очевидную эпидемиологическую связь; на основании вышеперчисленных признаков они были отнесены к госпитальному штамму.
В отделении гнойной остеологии проводилось эпидемиологическое наблюдение за внутрибольничными инфекциями, обусловленными метициллин-резистентными штаммами золотистого стафилококка (MRSA). В октябре 2008 года у четырех пациентов стационара был идентифицирован MRSA с генотипом 1 (наличие гена sea, при отсутствии генов seb, sec, pvl, tst). В связи с тем, что было предположено эпидемическое распространение госпитального штамма MRSA в стационаре, было решено провести бактериологическое обследование объектов окружающей среды стационара с целью выявления факторов передачи данного штамма. В результате данного обследования было выделено 4 культуры стафилококка: 139 вс (из смыва с ручки перевязочного столика), 140 вс (из смыва с ручки крана в перевязочной), 148 вс (смыв с рук медицинской сестры А.Н.), 1а (из воздуха перевязочной). Заявляемый способ был применен для отнесения данных культур к госпитальному штамму. Определение генов вирулентности (энтеротоксины А, В, С, ген токсического шока и ген токсина Пантона-Валлентайна) проводилось по методике M.Mehrortra и Lina G
В результате проведенных исследований культуры 139 вс и 140 вс были отнесены к генотипу 1 (наличие гена sea, при отсутствии генов seb, sec, pvl, tst), культура 148 вс была отнесена к генотипу 2 (наличие генов sea, seb, при отсутствии генов sec, pvl, tst), a при исследовании культуры 1а оказалось, что она не содержит исследуемых генов факторов патогенности. Таким образом, при сопоставлении генетических характеристик исследуемых культур с генетическими характеристиками штаммов, ранее обнаруженных в стационаре, культуры 139 вс и 140 вс были отнесены к госпитальному штамму, а культуры 148 вс и 1а не были отнесены к госпитальным.
Заявляемый способ апробирован при организации эпидемиологического наблюдения за внутрибольничными инфекциями в стационарах Санкт-Петербурга (гинекологическое отделение ГУЗ "Мариинская больница", отделение гнойной остеологии больницы им. Петра Великого, стационар городского центра профилактики СПИД и инфекцонных заболеваний). Всего было исследовано 105 штаммов энтерококков, 61 штамм золотистого стафилококка. В первых двух стационарах апробация заявляемого способа позволила выявить формирование госпитальных штаммов энтерококков и золотистого стафилококка. В связи с тем, что традиционно применяемый метод отнесения культур к госпитальному штамму, основанный на определении антибиотикограммы, обладает недостаточной специфичностью, для верификации правильности отнесения исследуемых культур к госпитальному штамму был использован метод эпидемиологического маркирования . Для определения принадлежности выделяемых культур к одному штамму (клональному типу) использована комбинацию нескольких методов внутривидового типирования, являющихся независимыми по отношению друг к другу (фаготип и антибиотикограмма для энтерококков, типирование методом электрофореза ДНК в пульсирующем поле, spa-сиквенстип и антибиотикограмма для стафилококков), а для доказательства того, что данный штамм вызывал связанные случаи заболеваний в стационаре, использован метод эпидемиологического наблюдения. Использование комбинации методов внутривидового типирования в сопоставлении с эпидемиологическими данными позволяет надежно идентифицировать госпитальный штамм . Всего с использованием заявляемого способа и метода сравнения было протестировано 38 культур микроорганизмов. Во всех случаях применение указанного методического приема позволило подтвердить правильность отнесения исследуемых культур к госпитальному штамму.
Таким образом, заявляемый способ позволяет идентифицировать госпитальные штаммы.
В отличие от способа, выбранного в качестве прототипа, заявляемый способ выявления госпитальных штаммов позволяет существенно сократить затраты времени на идентификацию госпитального штамма.
По нашим наблюдениям затраты времени по выявлению 5 генов факторов патогенности в 10 бактериальных штаммах составляют от 7 до 12 часов (от момента получения чистой культуры микрорганизма), таким образом, процесс отнесения исследуемого штамма к госпитальным составляет не более двух рабочих дней, в отличие от 10-15 дней при идентификации госпитального штамма способом, выбранным в качестве прототипа.
Для выполнения данного способа, в отличие от прототипа, не требуется высокой квалификации медицинского персонала, предполагающей овладение сложными молекулярно-генетическими (выделение и рестрикция плазмид) и микробиологическими (определение адгезии микроорганизма к эпителию) методиками. Кроме того, процесс идентификации генов методом ПЦР в отличие от характеристик, определяемых по способу, выбранному в качестве прототипа, может быть частично или полностью автоматизирован при использовании робототехники, что существенно сокращает затраты времени и трудовые затраты.
К особенностям предлагаемого способа относится также легкость интерпретации результатов, поскольку отнесение исследуемой культуры к госпитальным штаммам производится на основании всего лишь одного критерия - соответствии генотипической характеристики вирулентности исследуемого штамма генотипическим характеристикам вирулентности хотя бы одного из штаммов, выделенных от больных и окружающих предметов в лечебно-профилактическом учреждении.
Таким образом, заявляемый способ позволяет упростить выявление госпитальных штаммов и сократить время проведения способа.
Литература
1. Семина Н.А. Внутрибольничные инфекции как проблема биобезопасности. /Н.А.Семина. //Вестник Российской АМН. - 2002. - №10. - С.48-50.
2. Зуева Л.П., Яфаев Р.Х. Эпидемиология: Учебник. - СПб, 2006. - 752 с.
3. Пфаллер М.А., Кормикан М.Дж. Микробиологические аспекты проблемы внутрибольничных инфекций: роль клинической лаборатории. В кн. Р.П.Венцель. Внутрибольничные инфеции. М. 2004. - 840 с.
4. RU 2245922, 10.02.2005.
5. RU 2285258, 10.10.2006.
6. RU 2110579, 10.05.1998.
7. Яфаев Р.Х., Зуева Л.П. Эпидемиология внутрибольничной инфеции. Л.: Медицина, 1989. - 168 с.
8. Любимова А.В., Зуева Л.П., Еремин С.Р., Хрусталева Н.М., Любименко В.А., Пулин A.M., Шулаева С.В., Лещинская В.Н. Успехи внедрения системы инфекционного контроля в отделениях реанимации новорожденных. В кн.: Л.П. Зуева. Опыт внедрения инфекционного контроля в лечебно-профилактических учреждениях. СПб. 2003, с.91-129.
9. Яфаев Р.Х., Колоджиева В.В., Ермоленко Е.И., Суворов А.Н. Энтерококковые инфекции урогенитального тракта в условиях стационара и поликлиники. Стационарзамещающие технологии. Амбулаторная хирургия. №3 (23), 2006 г.
10. Becker К., A.W.Friedrich, G.Lubritz, M.Weilert, G.Peters, and C. von Eiff. 2003. Prevalence of genes encoding pyrogenic toxin superantigens and exfoliative toxins among strains of Staphylococcus aureus isolated from blood and nasal specimens. J. Clin. Microbiol. 41:1434-1439.
11. Schmidt, H. and Hensel, M. (2004) Pathogenicity islands in bacterial pathogenesis. Clin. Microbiol. Rev., 17, 14-56. 12, 656-664.
12. Mehrotra M., Wang G. and Johnson W.M. Multiplex PCR for detection of genes for Staphylococcus aureus enterotoxins, exfoliative toxins, toxic shock syndrome toxin 1, and methicillin resistance.// J. Clin. Microbiol. - 2000, 38, 3: 1032-1035.
13. Lina G., Piemont Y., et al. Involvement of Panton-Valentine leukocidin-producing Staphylococcus aureus in primary skin infections and pneumonia. Clin Infect Dis 1999; 29:1128-1132.
14. Шагинян И.А. Роль и место молекулярно-генетических методов в эпидемиологическом анализе внутрибольничных инфекций. Клин. микробиология и антимикробная химиотерапия." 2000. - Т2, №3, с.82-95.
| Гены и праймеры | Последовательность нуклеотидов 5′-3′ | Ожидаемый размер продукта амплификации н.п. | |
| gelE | gelE 1 | ACCCCGTATCATTGGTTT | 419 |
| gelE 2 | ACGCATTGCTTTTCCATC | ||
| esp | esp 1 | TTGCTAATGCTAGTCCACGACC | 933 |
| esp 2 | GCGTCAACACTTGCATTGCCGAA | ||
| sprE | spr 1 | GCGTCAATCGGAAGAATCAT | 233 |
| spr 2 | CGGGGAAAAAGCTACATCAA | ||
| fsrB | fsr 1 | TTTATTGGTATGCGCCACAA | 316 |
| fsr 2 | TCATCAGACCTTGGATGACG | ||
| asal | asa 1 | CCAGCCAACTATGGCGGAATC | 529 |
| asa 2 | CCTGTCGCAAGATCGACTGTA |
Способ выявления госпитальных штаммов, включающий определение генотипа штамма, отличающийся тем, что определяют генотипические характеристики вирулентности исследуемых штаммов и сопоставляют их с генотипическими характеристиками вирулентности штаммов, выделенных в лечебно-профилактическом учреждении, от больных и окружающих предметов, штаммы относят к госпитальным при соответствии генотипической характеристики вирулентности исследуемых штаммов генотипическим характеристикам вирулентности хотя бы одного из штаммов, выделенных в лечебно-профилактическом учреждении, от больных и окружающих предметов.
Как внутрибольничные или госпитальные инфекции следует рассматривать любые клинически распознаваемые инфекционные заболевания, возникающие у больных после госпитализации либо посещения лечебного учреждения с целью лечения, а также у медицинского персонала в силу осуществляемой им деятельности, независимо от того, проявляются или не проявляются симптомы этого заболевания во время нахождения данных лиц в медицинском учреждении. Инфекция, не находящаяся в стадии инкубации на момент поступления в стационар и развившаяся не раннее, чем через 48 часов после госпитализации.
Причины возникновения, роста и широкого распространения внутрибольничной инфекции
1. Профилактические и лечебные мероприятия с широким применением антибиотиков и других химиотерапевтических средств привели к тому, что были созданы условия для формирования новых внутригоспитальных штаммов, повышения вирулентности условно-патогенных микроорганизмов, приобретения патогенных свойств представителями нормальной микрофлоры.
2. Прогрессивное использование новых технологий в лечении, основанном на инвазивных методах (катетер-ассоциированные инфекции) и внедрение новых высокоспецифичных экспресс-методов лабораторной диагностики , позволяющих увеличить количество положительных результатов. Чаще всего внутрибольничное инфицированное возникает в отделениях реанимации и хирургии, при использовании аппаратуры для гемодиализа, искусственного дыхания, эндоскопических процедур, наркозной аппаратуры, переливания крови. Использование этого пути создает новые входные ворота для проникновения возбудителя, что позволило сформироваться новому искусственному артифициальному механизму передачи инфекции.
3. Сложившиеся в современных условиях тенденции к строительству крупных больничных комплексов, в которых находится большое количество ослабленных и больных пациентов, способствует формированию внутригоспитального инфицирования.
4. Широкое и подчас неоправданное применение антибактериальных средств, приводящее к формированию антибиотикорезистентности (появлению лекарственной устойчивости микроорганизмов).
5. Постоянно происходящая активизация естественных механизмов передачи возбудителя, возникающая в условиях постоянного контакта пациента и медицинского персонала, а также в результате контакта больных между собой.
6. Нарушения нормального биоценоза, который является мощным фактором неспецифической защиты организма. Примером может служить отсутствие грудного вскармливания .
7. Проблемы экологического характера: загрязнение окружающей среды, изменения условий жизни населения, приводящие к снижению резистентности организма и к неполноценной борьбе с возбудителем.
8. Недостаточные требования к соблюдению санитарно-гигиенического и противоэпидемического режима в лечебно-профилактических учреждениях, что приводит к возникновению новых вспышек заболеваемости. Нарушение принципов асептики: использование нестерильного инструмента.
9. Пользование готовыми лекарственными средствами, которые могут быть загрязнены микроорганизмами .
Микроорганизмы, вызывающие внутрибольничные инфекции.
Наиболее признанным определением понятия «госпитальный» штамм является следующее... «это штаммы микроорганизмов, которые выделяются от больных в стационаре, в процессе циркуляции адаптировались к условиям стационара и характеризуются ярко выраженной резистентностью ко многим антибиотикам (полирезистентны)». Таким образом, «госпитальный» штамм, есть результат селективного действия антибиотиков. Эти штаммы наиболее вирулентны и обладают множественной лекарственной устойчивостью . Это еще раз подтверждает мнение о том, что широкое применение антибиотиков, приводит к формированию порочного круга «успех лечения – селекция устойчивых штаммов – возникновение ВБИ».
Следующие группы ВБИ:
Первая группа: инфекции, вызванные патогенными микроорганизмами. Эта группа включает специфические инфекции, такие как корь, дифтерия, скарлатина, краснуха, паротит. Их доля во внутрибольничной инфекционной патологии составляет не более 15%. Возникновение и распространение этих инфекций связано с попаданием возбудителя в лечебное учреждение или происходит при заражении персонала при работе с инфицированным материалом.
Пути попадания патогенных возбудителей связаны, прежде всего, с поступлением в стационар больных, которые находятся в инкубационном периоде болезни или носителей патогенного возбудителя, или при контакте посетителей больниц в период вспышки, а также через передаваемые пищевые продукты.
Вторая группа: инфекции, вызванные условно-патогенными микроорганизмами, которые входят в состав нормальной микрофлоры организма . Их называют – оппортунистические инфекции , то есть инфекции, вызванные микробами оппортунистами.
Возбудители ВБИ:
1. Бактерии : Staphylococcus aureus (MRSA); другие стафилококки и микрококки; стрептококки групп А, В, С; энтерококки; анаэробные кокки; клостридии; неспорообразующие грамотрицательные бактерии; энтеробактерии (Salmonella, Shigella ); энтеропатогенные E. сoli, Proteus spp., Klebsiella spp.; Serratia spp.; Acenetobacter spp.; Enterobacter spp.; Pseudomonas aeruginosa; Flavobacterium meningosepticum; Corynebacterium diphtheriae; Listeria spp.; Mycobacterium tuberculosis; Bordetella pertussis; Camphylobacter spp.; Legionella spp.; Mycoplasma spp.; Chlamydia spp.
2. Вирусы: гепатитов, оспы,ветряной оспы, гриппа и других ОРЗ, герпесвирусы, цитомегаловирусы, кори, краснухи, ротавирусы, эпидемического паротита.
3. Грибы: Candida spp., Nocardia spp., Histoplasma capsulatum, Coccidioides immitis,Cryptococcus neoformans, Aspergillu spp. , Pneumocystis spp.
4. Простейшие: Toxoplasma, Cryptosporidium, Enterobius vermicularis, Hymenolepis diminuta.
– различные инфекционные заболевания, заражение которыми произошло в условиях лечебного учреждения. В зависимости от степени распространения различают генерализованные (бактериемию, септицемию, септикопиемию, бактериальный шок) и локализованные формы внутрибольничных инфекций (с поражением кожи и подкожной клетчатки, дыхательной, сердечно-сосудистой, урогенитальной системы, костей и суставов, ЦНС и т. д.). Выявление возбудителей внутрибольничных инфекций проводится с помощью методов лабораторной диагностики (микроскопических, микробиологических, серологических, молекулярно-биологических). При лечении внутрибольничных инфекций используются антибиотики, антисептики, иммуностимуляторы, физиотерапия, экстракорпоральная гемокоррекция и т. д.
Общие сведения
Внутрибольничные (госпитальные, нозокомиальные) инфекции - инфекционные заболевания различной этиологии, возникшие у пациента или медицинского сотрудника в связи с пребыванием в лечебно-профилактическом учреждении. Инфекция считается внутрибольничной, если она развилась не ранее 48 часов после поступления больного в стационар. Распространенность внутрибольничных инфекций (ВБИ) в медицинских учреждениях различного профиля составляет 5-12%. Наибольший удельный вес внутрибольничных инфекций приходится на акушерские и хирургические стационары (отделения реанимации, абдоминальной хирургии, травматологии , ожоговой травмы, урологии , гинекологии , отоларингологии , стоматологии, онкологии и др.). Внутрибольничные инфекции представляют собой большую медико-социальную проблему, поскольку утяжеляют течение основного заболевания, увеличивают длительность лечения в 1,5 раза, а количество летальных исходов - в 5 раз.
Этиология и эпидемиология внутрибольничных инфекций
Основными возбудителями внутрибольничных инфекций (85% от общего числа) выступают условно-патогенные микроорганизмы: грамположительные кокки (эпидермальный и золотистый стафилококк, бета-гемолитический стрептококк , пневмококк, энтерококк) и грамотрицательные палочковидные бактерии (клебсиеллы, эшерихии, энтеробактер, протей, псевдомонады и др.). Кроме этого, в этиологии внутрибольничных инфекций велика удельная роль вирусных возбудителей простого герпеса , аденовирусной инфекции , гриппа , парагриппа, цитомегалии , вирусных гепатитов , респираторно-синцитиальной инфекции , а также риновирусов , ротавирусов, энтеровирусов и пр. Также внутрибольничные инфекции могут быть вызваны условно-патогенными и патогенными грибами (дрожжеподобными, плесневыми, лучистыми). Особенностью внутригоспитальных штаммов условно-патогенных микроорганизмов служит их высокая изменчивость, лекарственная резистентность и устойчивость к воздействию факторов среды (ультрафиолета, дезинфектантов и пр.).
Источниками внутрибольничных инфекций в большинстве случаев выступают пациенты или медицинский персонал, являющиеся бактерионосителями или больными стертыми и манифестными формами патологии. Как показывают исследования, роль третьих лиц (в частности, посетителей стационаров) в распространении ВБИ невелика. Передача различных форм госпитальной инфекции реализуется с помощью воздушно-капельного, фекально-орального, контактного, трансмиссивного механизма. Кроме этого, возможен парентеральный путь передачи внутрибольничной инфекции при проведении различных инвазивных медицинских манипуляций: забора крови, инъекций, вакцинации , инструментальных манипуляций, операций, ИВЛ , гемодиализа и пр. Таким образом в медучреждении возможно заразиться гепатитами , и , гнойно-воспалительными заболеваниями, сифилисом , ВИЧ-инфекцией . Известны случаи внутрибольничных вспышек легионеллеза при приеме больными лечебного душа и вихревых ванн.
Факторами, участвующими в распространении внутрибольничной инфекции, могут выступать контаминированные предметы ухода и обстановки, медицинский инструментарий и аппаратура, растворы для инфузионной терапии, спецодежда и руки медперсонала, изделия медицинского назначения многоразового использования (зонды, катетеры, эндоскопы), питьевая вода, постельные принадлежности, шовный и перевязочный материал и мн. др.
Значимость тех или иных видов внутрибольничной инфекции во многом зависит от профиля лечебного учреждения. Так, в ожоговых отделениях преобладает синегнойная инфекция , которая в основном передается через предметы ухода и руки персонала, а главным источником внутрибольничной инфекции являются сами пациенты. В учреждениях родовспоможения основную проблему представляет стафилококковая инфекция, распространяемая медицинским персоналом-носителем золотистого стафилококка. В урологических отделениях доминирует инфекция, вызываемая грамотрицательной флорой: кишечной, синегнойной палочкой и др. В педиатрических стационарах особую значимость имеет проблема распространения детских инфекций – ветряной оспы , эпидемического паротита , краснухи , кори . Возникновению и распространению внутрибольничной инфекции способствуют нарушение санитарно-эпидемиологического режима ЛПУ (несоблюдение личной гигиены, асептики и антисептики, режима дезинфекции и стерилизации, несвоевременное выявление и изоляция лиц-источников инфекции и т. д.).
К группе риска, в наибольшей степени подверженной развитию внутрибольничной инфекции, относятся новорожденные (особенно недоношенные) и дети раннего возраста; пожилые и ослабленные пациенты; лица, страдающие хроническими заболеваниями (сахарным диабетом , болезнями крови, почечной недостаточностью), иммунодефицитом, онкопатологией. Восприимчивость человека к внутрибольничным инфекциям увеличивается при наличии у него открытых ран, полостных дренажей, внутрисосудистых и мочевых катетеров, трахеостомы и других инвазивных устройств. На частоту возникновения и тяжесть течения внутрибольничной инфекции влияет долгое нахождение пациента в стационаре, длительная антибиотикотерапия, иммуносупрессивная терапия.
Классификация внутрибольничных инфекций
По длительности течения внутрибольничные инфекции делятся на острые, подострые и хронические; по тяжести клинических проявлений – на легкие, среднетяжелые и тяжелые формы. В зависимости от степени распространенности инфекционного процесса различают генерализованные и локализованные формы внутрибольничной инфекции. Генерализованные инфекции представлены бактериемией, септицемией, бактериальным шоком. В свою очередь, среди локализованных форм выделяют:
- инфекции кожи, слизистых и подкожной клетчатки, в т. ч. послеоперационных, ожоговых, травматических ран. В частности, к их числу относятся омфалит , абсцессы и флегмоны , пиодермия , рожа , мастит , парапроктит , грибковые инфекции кожи и др.
- инфекции полости рта (стоматит) и ЛОР-органов (ангина , фарингит , ларингит , эпиглоттит , ринит , синусит , отит , мастоидит)
- инфекции бронхолегочной системы (бронхит , пневмония , плеврит , абсцесс легкого , гангрена легкого , эмпиема плевры , медиастинит)
- инфекции пищеварительной системы (гастрит , энтерит , колит , вирусные гепатиты)
- глазные инфекции (блефарит , конъюнктивит , кератит)
- инфекции урогенитального тракта (бактериурия, уретрит , цистит , пиелонефрит , эндометрит, аднексит)
- инфекции костно-суставной системы (бурсит , артрит , остеомиелит)
- инфекции сердца и сосудов (перикардит , миокардит , эндокардит , тромбофлебиты).
- инфекции ЦНС (абсцесс мозга , менингит , миелит и др.).
В структуре внутрибольничных инфекций на долю гнойно-септических заболеваний приходится 75-80%, кишечных инфекций - 8-12%, гемоконтактных инфекций - 6-7%. На прочие инфекционные заболевания (ротавирусные инфекции, дифтерию , туберкулез , микозы и др.) приходится около 5-6%.
Диагностика внутрибольничных инфекций
Критериями, позволяющими думать о развитии внутрибольничной инфекции, служат: возникновение клинических признаков заболевания не ранее чем через 48 часов после поступления в стационар; связь с проведением инвазивного вмешательства; установление источника инфекции и фактора передачи. Окончательное суждение о характере инфекционного процесса получают после идентификации штамма возбудителя с помощью лабораторных методов диагностики.
Для исключения или подтверждения бактериемии проводится бактериологический посев крови на стерильность, желательно не менее 2-3-х раз. При локализованных формах внутрибольничной инфекции микробиологическое выделение возбудителя может быть произведено из других биологических сред, в связи с чем выполняется посев мочи, кала, мокроты, отделяемого ран, материала из зева, мазка с конъюнктивы, из половых путей на микрофлору. Дополнительно к культуральному методу выявления возбудителей внутрибольничных инфекций используются микроскопия, серологические реакции (РСК, РА, ИФА, РИА), вирусологический, молекулярно-биологический (ПЦР) методы.
Лечение внутрибольничных инфекций
Сложности лечения внутрибольничной инфекции обусловлены ее развитием в ослабленном организме, на фоне основной патологии, а также резистентностью госпитальных штаммов к традиционной фармакотерапии. Больные с диагностированными инфекционными процессами подлежат изоляции; в отделении проводится тщательная текущая и заключительная дезинфекция. Выбор противомикробного препарата основывается на особенностях антибиотикограммы: при внутрибольничной инфекции, вызванной грамположительной флорой наиболее эффективен ванкомицин; грамотрицательными микроорганизмами – карбапенемы, цефалоспорины IV поколения, аминогликозиды. Возможно дополнительное применение специфических бактериофагов, иммуностимуляторов, интерферона, лейкоцитарной массы, витаминотерапии.
При необходимости проводится чрескожное облучение крови (ВЛОК, УФОК), экстракорпоральная гемокоррекция (гемосорбция , лимфосорбция). Симптоматическая терапия осуществляется с учетом клинической формы внутрибольничной инфекции с участием специалистов соответствующего профиля: хирургов , травматологов , пульмонологов, урологов, гинекологов и др.
Профилактика внутрибольничных инфекций
Основные меры профилактики внутрибольничных инфекций сводятся к соблюдению санитарно-гигиенических и противоэпидемических требований. В первую очередь, это касается режима дезинфекции помещений и предметов ухода, применения современных высокоэффективных антисептиков, проведения качественной предстерилизационной обработки и стерилизации инструментария, безукоснительного следования правилам асептики и антисептики.
Медицинский персонал должен соблюдать меры индивидуальной защиты при проведении инвазивных процедур: работать в резиновых перчатках, защитных очках и маске; осторожно обращаться с медицинским инструментарием. Большое значение в профилактике внутрибольничных инфекций имеет вакцинация медработников от гепатита В, краснухи, гриппа, дифтерии, столбняка и других инфекций. Все сотрудники ЛПУ подлежат регулярному плановому диспансерному обследованию, направленному на выявление носительства патогенов. Предупредить возникновение и распространение внутрибольничных инфекций позволит сокращение сроков госпитализации пациентов, рациональная антибиотикотерапия, обоснованность проведения инвазивных диагностических и лечебных процедур, эпидемиологический контроль в ЛПУ.
Госпитальные, или внутрибольничные инфекции - любое клинически распознаваемое микробное заболевание, которое поражает больного в результате его поступления в больницу или обращения в нее за лечебной помощью, или сотрудника больницы следствие его работы в данном учреждении, независимо от того, проявились симптомы заболевания в стационаре или вне его (М. Паркер, 1978).
Для обозначения этой группы инфекционных заболеваний используют следующие термины:
внутрибольничные инфекции - обозначение инфекционного заболевания в стационаре, вне зависимости от сроков появления симптомов заболевания (во время пребывания в больнице или после выписки); к ним относятся и заболевания сотрудников лечебного учреждения, возникающие в результате заражения в больнице;
госпитальные инфекции - более широкое понятие, объединяющее внутрибольничные заражения и заболевания, которые возникают в стационаре, но обусловлены заражением не только в нем, но и до поступления;
ятрогенные инфекции - прямое следствие медицинских вмешательств.
Распространенность. В нынешнее время в развитых странах внутрибольничные гнойно-септические инфекции (ГСИ) возникают у 5-12 % госпитализированных лиц; каждый 12-й смертный случай в больнице - результат госпитальной инфекции. В США ежегодно регистрируется 2 млн. заболеваний в стационарах, то есть примерно 1 % населения в год страдает от госпитальных инфекций. Значительно число внутрибольничных заболеваний в Германии - 500-700 тыс. в год. В Швеции и Англии они регистрируются еще чаще - 6 % и 7-10 % соответственно. В странах СНГ до 35 % хирургических вмешательств осложняют ГСИ и с этим связано свыше 40 % случаев постоперационного летального исхода.
Особенности внутрибольничных инфекций. Внутрибольничные инфекции имеют следующие характерные черты, отличающие их от остальных инфекционных заболеваний:
возникают у уже больного человека, находящегося на стационарном лечении;
всегда являются инфекционным осложнением основного заболевания, по поводу которого больной поступил в стационар;
возникают в профильных отделениях больниц, то есть у больных, имеющих одинаковое заболевание, а следовательно, получающих однотипное лечение;
проявляются как обычные («классические» - сальмонеллез, дизентерия, грипп и др.) и как гнойно-септические инфекции;
возбудителями выступают все виды микроорганизмов - вирусы, прокариоты, эукариоты, простейшие;
возбудители могут быть и патогенные, и условно-патогенные, и непатогенные микроорганизмы;
источником инфекции являются экзогенные и эндогенные факторы;
для возбудителей госпитальных инфекций характерна особая совокупность свойств, определяемая понятием «госпитальный штамм».
Этиология. Согласно классификации ВОЗ, к микроорганизмам, наиболее часто вызывающим внутрибольничные инфекции, отнесены:
грамположительные кокки: золотистый стафилококк, другие стафилококки и микрококки, стрептококки групп А, В, С, энтерококки, другие негемолитические стрептококки, анаэробные кокки;
анаэробные бактерии: гистотоксические клостридии, возбудитель столбняка, неспорообразующие грамотрицательные бактерии;
грамотрицательные аэробные бактерии: энтеробактерии (саль-монеллы, шигеллы), энтеропатогенные кишечные палочки, протей, клебсиелла, синегнойная палочка и др.;
другие бактерии: возбудители дифтерии, туберкулеза, коклюша, листериоза;
вирусы: гепатитов, ветряной оспы, гриппа, других ОРЗ, герпеса, цитомегалии, кори, краснухи, ротавирусы;
грибы: кандиды, нокардии, плесени, гистоплазмы, кокцидии, криптококки;
прочие: пневмоциста, токсоплазма.
В структуре современных госпитальных инфекций септические инфекции мочевыводящих, дыхательных путей, раневые инфекции и сепсис составляют около 85 %, в то время как на «классические» инфекции - ЦНС, кишечные и прочие - приходится 15-16 %.
Приведенный список далеко не исчерпывает всех возбудителей, наглядно доказывая, что в стационарах могут быть распространены весьма отличные друг от друга микроорганизмы. Это является основанием для их группировки.
Госпитальные штаммы - это отобранные в госпитальных условиях из гетерогенной популяции штаммы возбудителя, характеризующиеся, прежде всего полирезистентностью к антибиотикам. Считается, что госпитальный штамм - это штамм воз-
Адаптация госпитального штамма к условиям определенного стационара приводит к тому, что вне сложившейся экологической системы он оказывается мало жизнеспособным. В связи с этим вынесенные за пределы лечебного учреждения госпитальные штаммы быстро теряют свойства «госпитализма», а занос в другой стационар или отделение может быть только при определенных условиях, сходных с предыдущим стационаром.
Отличительными свойствами госпитальных штаммов являются: устойчивость к антибактериальным препаратам, антисептикам и антибиотикам, применяемым в качестве базовых для лечения больных; устойчивость к дезинфектантам, в том числе хлорсодержащим (хлорамин и др.), к которым у возбудителя устойчивость формируется по хромосомному типу; однотипная фаголизабельность (так, в условиях стационара преобладают стафилококки I и III фагогрупп, а во внебольничных - стафилококки II фагогруппы); наличие в антигенной структуре госпитального штамма антигенов мимикрии, однотипных органам и тканям больных, определяющих клиническую про-филированность отделения или стационара; высокая степень вирулентности, связанная с многократными пассажами через организм больных.
Разнообразие микроорганизмов, выступающих в роли возбудителей внутрибольничных инфекций, предопределяет особенности их эпидемиологических источников (табл. 5).
Таблица 5
Группировка возбудителей внутрибольничных инфекций с учетом эпидемиологического анамнеза (по Р. X. Яфаеву, Л. П. Зуевой, 1989)
Патогенные
прием на стационарное лечение больных, находящихся в инкубационном периоде другой инфекции (для инфекционных больных);
ошибочный диагноз основного заболевания; смешанная инфек-
ция; прием больного-бактерионосителя (невыявленное носительство возбудителя дифтерии, эпидемического менингита, дизентерии и т. д.); наличие невыявленных бактерионосителей патогенных микроорганизмов среди медицинского и обслуживающего персонала; нарушение санитарных норм размещения и обслуживания больных, стерилизация инструментария, несоблюдение асептики при изготовлении лекарственных препаратов (особенно для парентерального введения). По сути этот путь возникновения и эпидемиологического распространения является заносом инфекции - наиболее часто в виде вспышки с одновременным массовым заболеванием пациентов стационара и последующим постепенным снижением вновь регистрируемых заболеваний. Среди наиболее частых возбудителей госпитальных инфекций с экзогенным источником заражения - возбудители инфекций дыхательных путей (источником могут быть как не распознанные больные, так и инфицированный медицинский персонал или посетители): грипп, корь, краснуха, ветряная оспа, аденовирусная инфекция, скарлатина, эпидемический паротит и др. Среди бактериальных инфекций наиболее часто встречаются дизентерия, брюшной тиф, сальмонеллезы, эшерихиозы. Большую опасность представляет инфекция ятрогенного генеза - вирусный гепатит В, С, СПИД. Возникновение и распространение этих инфекций причинно связано как с некачественной диагностикой, так и с грубыми нарушениями медицинским персоналом нормативных правил асептики и антисептики. Необходимо иметь в виду, что перечисленные микроорганизмы не относятся к истинно госпитальным возбудителям, поскольку они не формируют госпитальных штаммов и способны поражать не только больного, но и здорового человека. Их распространение не ограничено определенным лечебным учреждением, а подчиняется общим эпидемиологическим закономерностям.
Особую эпидемиологическую распространенность, опасность и высокий процент летальных исходов имеют госпитальные гнойно-септические инфекции, возбудителями которых наиболее часто являются условно-патогенные микроорганизмы, представляющие эндогенную и экзогенную микрофлору. В этих случаях реализации патогенного потенциала возбудителей способствует сниженная резистентность больного, высокая адаптационная способность микроорганизма к условиям данного стационара, селекция устойчивых вариантов, эпидемиологическое распространение из эндогенных источников на основе нормальной или транзиторной микрофлоры больного.
Наконец, отчетливая тенденция к росту отмечена для ятрогенных инфекций. Этому способствуют достижения современной фармацевтической промышленности и медицинской техники, приведшие к широкому использованию гормональных препаратов,
цитостатиков и иммунодепрессантов, лечебному применению радио- и рентгенотерапии, ведущих к снижению и так ослабленных в результате заболевания защитных сил организма (искусственное снижение) и повышению уровня возникновения внутри больничного эпидемиологического процесса. Использование трансплантационных медицинских технологий также способствует возникновению госпитальных гнойно-септических инфекций. Наиболее часто они возникают в хирургических, ожоговых, травматологических, урологических отделениях, родильных домах.
Эпидемический процесс госпитальных гнойно-септических инфекций (ГГСИ) в хирургических стационарах отличается рядом особенностей: развитием процесса в замкнутом, ограниченном пространстве стационара среди людей, ослабленных основным заболеванием и оперативным вмешательством; непрерывностью течения эпидемического процесса; прямой зависимостью интенсивности эпидемического процесса от степени агрессивности и инвазивности лечебно-диагностического процесса; зависимостью характера течения эпидемического процесса от типа стационара; существенным значением как источника инфекции внешней среды стационара; формированием помимо широко распространенного контактного, специфических путей передачи инфекции: инструментального, имплантационного; превалированием в этиологической структуре условно-патогенной микрофлоры; участием в эпидемическом процессе одновременно большого числа разных возбудителей; полиморфизмом этиологии и клинических проявлений и выраженной зависимостью клиники от локализации основного заболевания, характера оперативного вмешательства; мощным постоянным воздействием антибиотиков на микробные популяции и иммунную систему больных.
О развитии госпитальной инфекции свидетельствуют: увеличение частоты выделения возбудителей от больных в прямо пропорциональной зависимости от сроков их пребывания в стационаре; обнаружение идентичных госпитальных штаммов у инфицированных больных и в окружающей среде стационара; снижение частоты осложнений от соответствующего возбудителя при проведении соответствующих санитарных и противоэпидемических мероприятий.
Эпидемиологический надзор за ГГСИ включает: регистрацию ГГСИ; выявление ведущих источников инфекции, путей передачи, факторов, групп, времени риска, мест заражения; непрерывное наблюдение за формированием резистентности у основных возбудителей госпитальных инфекций с параллельным анализом поступления, распределения и использования антибиотиков; организацию службы антибактериальной химиотерапии с современными лабораторными методами контроля за применением антибиотиков; организацию соответствующих исследо-
ваний госпитальной флоры с типированием возбудителя, определение плазмидного спектра (без чего совершенно невозможна квалифицированная эпидемиологическая работа); прогнозирование эпидемического процесса; организацию систематического обучения врачей и среднего медицинского персонала основам эпидемиологии и профилактики госпитальных инфекций, антибактериальной химиотерапии; разработку и организацию профилактических и противоэпидемических мер на основе результатов эпидемиологической диагностики в данном конкретном стационаре; контроль за выполнением профилактических, стерилизационно-дезинфек-ционных и противоэпидемических мероприятий; оценку эффективности эпидемиологического надзора.
Принципы борьбы и профилактики ГГСИ. Эффективность борьбы с госпитальными инфекциями определяется сооружением больничных помещений в соответствии с последними научными достижениями, современным оснащением больниц и строгим выполнением требований противоэпидемического режима на всех этапах лечебного обслуживания больных.
Для многопрофильного взрослого или детского соматического стационара проектированием предусматривается сооружение единого многоэтажного здания. Традиционные инфекции среди взрослых возникают очень редко и обычно локализуются в пределах отделения. ГГСИ также не имеют выраженной тенденции к перемещению из отделения в отделение (специфическая флора, свой госпитальный штамм, передача возбудителя только в определенных местах), поэтому эксплуатация большого здания вполне оправдана.
Совершенствование проектирования лечебных учреждений сводится к созданию многопрофильных больниц для взрослых и однопрофильных - для детей; боксированность и маломестность палат.
Соблюдение противоэпидемического режима связано прежде всего с предупреждением заноса инфекции, для чего предусмотрено: осмотр и лабораторное обследование вновь поступающих на работу; периодические осмотры и лабораторный контроль постоянно работающих лиц; смена персоналом уличной одежды на рабочую перед входом в отделение; инструктаж по проведению основных санитарно-эпидемических мероприятий на порученном данному сотруднику участке работы; периодическая сдача норм санитарного минимума; строгое закрепление персонала за отделениями.
Для поступающих больных - комплексное бактериологическое обследование, санация носителей госпитальных штаммов. Кроме того, необходимо строгое соблюдение режима обеззараживания объектов в стационарах, применение физических и химических методов дезинфекции.
Похожая информация.