Содержание статьи
Клебсиеллы
Название дано в честь Э. Клебса. К роду Klebsiella относятся два вида: Klebsiella pneumoniae и Enterobacter. Первый вид подразделен на два подвида: К. ozenae, К. rinoscleromatis.Морфология и физиология
Представители вида Klebsiella pneumoniae - короткие, толстые, неподвижные грамотрицательные палочки, образующие в отличие от других энтеробактерий выраженные полисахаридные капсулы. Клебсиеллы, так же как другие энтеробактерий, нетребовательны к питательным средам. Они ферментируют глюкозу с кислотой и газом и используют ее и цитрат в качестве единственного источника углерода, а аммиак - источника азота. Подвиды клебсиелл различают по биохимическим признакам. В отличие от вида Enterobacter, К. pneumoniae лишены жгутиков, не синтезируют орнитиндекарбоксилазу, ферментируют сорбит. Дифференциация разных видов клебсиелл проводится на основании их неодинаковой способности ферментировать углеводы, образовывать уреазу и лизиндекарбоксилазу, утилизировать цитрат и других признаков. Клебсиеллы образуют слизистые колонии.Антигены
Клебсиеллы содержат О- и К-антигены. Всего известно около 11 О-антигенов и 70 К-антигенов. Последние представлены капсульными полисахаридами. Серологическая идентификация клебсиелл основана на их антигенных различиях. Наибольшее число О- и К-антигенов содержат К. pneumoniae. Некоторые О- и К-антигены клебсиелл родственны О-антигенам эшерихий и сальмонелл.Патогенность и патогенез
Вирулентность клебсиелл пневмонии обусловлена их адгезией, связанной с капсульным полисахаридом, пилями и белком наружной мембраны, последующим размножением и колонизацией энтероцитов. Капсула также защищает бактерии от действия фагоцитирующих клеток. При разрушении бактериальных клеток освобождается эндотоксин (ЛПС). Кроме того, клебсиеллы пневмонии секретируют термостабильный энтеротоксин, усиливающий выпот жидкости в просвет тонкой кишки, что играет существенную роль в патогенезе ОКЗ, и мембранотоксин с гемолитической активностью. Клебсиеллы являются возбудителями пневмонии, ОКЗ, риносклеромы, озены. Они также могут вызывать поражения мочеполовых органов, мозговых оболочек взрослых и детей, токсико-сеп-тические состояния и ОКЗ у новорожденных. Клебсиеллы могут вызывать внутрибольничные инфекции. Для пневмонии, вызванной К. pneumoniae, характерны образование множественных очагов в дольках легкого с последующим их слиянием и ослизнением пораженной ткани, содержащей большое количество клебсиелл. Возможно образование гнойных очагов в других органах и развитие сепсиса. При склероме, вызванной К. rhinoscleromatis, поражается слизистая оболочка носа (риносклерома), носоглотки, трахеи, бронхов. В тканях образуются гранулемы с последующими склеротическими изменениями. При озене, вызванной К. ozenae, поражается слизистая оболочка носа и придаточных полостей с последующей атрофией носовых раковин и выделением зловонного секрета.Иммунитет
Клебсиеллы вызывают гуморальный и клеточный иммунный ответ. Однако образующиеся антитела не обладают про-тектиными свойствами. Развитие ГЗТ связано с внутриклеточной локализацией клебсиелл.Экология и эпидемиология
Клебсиеллез является антропонозной инфекцией. Источник инфекции - больные и носители. Заражение происходит через респираторные пути. Клебсиеллы входят в состав кишечного биоценоза, обнаруживаются на коже и слизистых оболочках. Они устойчивы к факторам окружающей среды и сравнительно долго сохраняются в почве, воде, в помещениях. В молочных продуктах выживают и размножаются при хранении их в холодильниках. При нагревании погибают уже при температуре 65°С, чувствительны к растворам обычных дезинфектантов.Клебсиелезы
Клебсиельозы - заболевания, которые вызывают бактерии рода Klebsiella. Они могут быть острыми и хроническими, острые вызывают Klebsiella pneumoniae, Koxytoca, Kplanticola, Kterrigena, хронические - Kozaenae и Krhinoscleromatis. Чаще всего воспалительные и септические процессы вызывает Крпеитопиае - пневмонии, бронхиты, септицемии, отиты, перитониты, желчных и мочевыводящих путей, пищевые токсикоинфекции, госпитальные раневые и ожоговые инфекции подобное. Значительно реже встречаются такие хронические болезни, как зловонный насморк (озена) и риносклерома. В последнее время резистентные к антибиотикам штаммы клебсиелл могут стать возбудителями внутрибольничных инфекций.Основным методом лабораторной диагностики клебсиельозив является бактериологическое исследование. Серологический метод применяют редко. Проводят также микроскопию мазков.Материалом для микробиологического анализа может быть мокроты, слизи из рото-и носоглотки, промывные воды и рвотные массы, гной, кровь, ликвор, моча, желчь, стул, секционный материал, инфильтраты слизистой при риносклероме, корочки при озене, смывы с предметов и т.п..Бактериоскопия
В мазках, окрашенных по Граму, капсульные формы клебсиелл имеют вид грамотрицательных, эллипсовидные, толстых палочек длиной 5-8 мкм и шириной 3-5 мкм. Безкапсульни формы имеют меньшие размеры (0,3-0,6 х 1-3 мкм), одиночное, парное или цепную расположения. В гистологических срезах с склеромних гранулем видно много гигантских клеток Микулича, наполненных желатиноподибною массой, в которой находятся клебсиеллы, окруженные капсулой.Бактериологическое исследование
Бактериологическое исследование проводят по такой же схеме, что и при подобных заболеваниях, вызванных другими видами энтеробактерий. Посев материала производят на селективное среду К-2 (МПА с мочевиной, рафиноза, бромтимоловый синим). Через сутки на нем вырастают крупные, выпуклые, блестящие, слизистые колонии желтого, зеленовато-желтого или голубого цвета. На средах Эндо и Плоскирева большинство клебсиелл образуют колонии с металлическим блеском, характерные для лактозоположительных бактерий.На простом или глицериновом агаре через 2-4 ч выращивания основные виды клебсиелл образуют характерные колонии с различной внутренней структурой, выявляемые при агар-микроскопии таких молодых колоний. В К pneumoniae они петлеобразную устройство, у К. rhinoskleromatis - концентрическую, а в К ozenae - рассеянно концентрическую. Это позволяет дифференцировать названные виды клебсиелл между собой.Пожилые колонии микроскопируют и отсеивают на косой агар для выделения чистых культур. Идентификацию последних проводят посевом в среды пестрого ряда Гисса, желчный бульон, определяют подвижность, наличие уреазы. Клебсиеллы неподвижные, большинство штаммов разлагают глюкозу, лактозу, сахарозу, мочевину, дают положительную реакцию Фогес - Проскауэра, не выделяют сероводород.И все же основной и надежной является серологическая идентификация клебсиелл. Для ее проведения используют две реакции: капсульную агглютинацию на стекле с живой культурой и О-агглютинацию. При постановке первой из них на предметное стекло наносят диагностические протиклебсиельозни капсульныесыворотки, а также каплю 0,9% раствора хлорида натрия (контроль). У капель сывороток и изотонического раствора растирают полную петлю исследуемой культуры, смешивают их, добиваясь тщательной гомогенизации. При положительном результате образуется аглютинат в виде грубых нитей или тяжей. В контрольной капли агглютинации не должно быть.Для О-аилютинации выделены культуры стерилизуют в автоклаве в течение 150 мин при 2-х атм. При этом разрушается капсула, культура не взаимодействует с К-сыворотками и аглютинуеться О-сыворотками. Простерилизованную культуру нужно дважды отмыть в физиологическом растворе путем центрифугирования и с осадком поставить реакцию агглютинации на стекле.Из дополнительных методов идентификации клебсиелл используют фаготипирования. Фаги капсульных бактерий имеют четкую видовую специфичность. Техника проведения реакции агглютинации и фаготипирования подробно изложена в инструкции к соответствующим препаратам.Определяют также чувствительность выделенных культур к антибиотикам с помощью дискодифузийного метода.Серологические исследования
Серологические исследования проводят путем постановки развернутой реакции агглютинации с сывороткой крови больных и капсульный и безкапсульним антигенами, а также связывания комплемента (титр 1:40 и выше) и более чувствительной и специфической реакции непрямой гемагглютинации с эритроцитарным клебсиельозним диагностикумом. Для постановки последней сыворотку больных разводят в лунках полистироловых планшет от 1:20 до 1:320 в объеме 0,25 мл и добавляют такой же объем 1% взвеси сенсибилизированных эритроцитов. Учет результатов проводят через 2 ч экспозиции планшет при 37 ° С. Диагностический титр 1:160 и выше. Надежнее результаты получают при постановке реакции в динамике, когда обнаруживают 4-кратное нарастание титра антител.Профилактика и лечение
Специфическая вакцинопрофилактика клебсиеллезов не разработана. Для лечения применяют антибиотики, из которых цефалоспорины третьего поколения являются наиболее эффективными.Капсульные бактерии — клебсиеллы — обнаруживаются в слизи зева и носа, выделениях из дыхательных путей и легких, на объектах внешней среды. Они относятся к семейству Enterobacteriaceae, роду Klebsiella. Клебсиеллы обладают способностью образовывать капсулы как в организме, так и на питательных средах.
Клебсиеллы — толстые короткие палочки размером 2—5*0,3—1,25 мкм, с закругленными концами, неподвижные. Спор не образуют. В мазках располагаются попарно или одиночно, обычно окружены капсулой, грам-отрицательны. Хорошо растут на простых питательных средах при температуре 35—37°С. На мясо-пептонном агаре образуют мутные слизистые колонии, в бульоне — интенсивное помутнение. Характер роста на агаре и ферментативные свойства приведены в табл. 6. Клебсиеллы не образуют экзотоксинов, содержат эндотоксины. Капсульные бактерии включают три антигена: капсульный (К-антиген), соматический гладкий (О-антиген), соматический шероховатый (R-антиген); К- и О-антигены являются углеводами, R-антиген — протеином.
Резистентность клебсиелл достаточно высокая: при комнатной температуре они сохраняются месяцами, при нагревании до 65°С погибают в течение часа. Чувствительны к действию различных дезинфицирующих веществ: раствора хлорамина, фенола и др.
Вирулентность клебсиелл связана с наличием у них капсул. Бактерии, утратившие капсулу, становятся невирулентными и при введении в организм животного быстро фагоцитируются. Капсульные варианты вызывают гибель мышей через 24—48 ч после заражения с обсеменением всех органов.
У человека клебсиеллы приводят к заболеванию пневмонией, озеной и риносклеромой. Klebsiella pneumoniae (палочка Фридлендера) вызывает у человека бронхопневмонию, которая протекает с поражением одной или нескольких долей легкого.
Возможны сливные очаги и абсцессы в легком. Летальность высокая. Иногда клебсиеллы пневмонии могут вызвать пиемию, менингит, аппендицит, цистит и смешанные инфекции. Klebsiella ozaeпае является возбудителем зловонного насморка, который встречается в Испании, Индии, Китае, Японии. Случаи озены известны и в СССР. При заболевании поражаются слизистая оболочка носа, глотки, трахеи, гортани, а также придаточные полости носа и носовые раковины. Для озены характерно выделение вязкого секрета, подсыхающего с образованием плотных корочек, затрудняющих дыхание и издающих зловонный запах. Заболевание передается воздушно-капельным путем. Klebsiella rhinoscleromatis (палочка Волковича — Фриша) вызывает хронический гранулематозный процесс на коже, слизистой оболочке носа, трахеи, гортани, бронхов. Риносклерома — малозаразная хроническая болезнь, которая встречается в Австрии, Польше, а также в СССР. Клебсиеллы риносклеромы обнаруживаются внутриклеточно и внеклеточно в соскобах из узелков (гранулем) тканей в виде коротких палочек, окруженных капсулой.
Иммунитет. После перенесенного заболевания нестойкий.
Микробиологическая диагностика . Осуществляется с помощью микробиологического и серологического методов. Исследуемый материал: мокрота (при пневмонии), слизь из зева, носа, трахеи (при озене), кусочки ткани из гранулем (при риносклероме).
Посевы производят на мясо-пептонный или глицериновый агар, а также на дифференциальные среды—бромтимоловый или бромкрезоловый агар. Инкубируют при 37°С. Через 24 ч из выросших слизистых колоний делают пересев на скошенный агар. Изучают ферментативные свойства полученной чистой культуры.
Для дифференциации капсульных бактерий рекомендуется также изучение строения молодых л колоний на чашке с мясо-пептонным агаром. Палочки пневмонии расположены в молодых колониях петлеобразно, палочки риносклеромы — концентрически, палочки озены — концентрически и рассеянно (см. табл. 6).
Серологическая диагностика осуществляется путем постановки реакции связывания комплемента и реакции агглютинации. Как вспомогательный метод используют кожную аллергическую пробу, но она менее специфична, чем серологические реакции.
Профилактика и лечение
. Своевременное выявление больных и их госпитализация.
Для лечения назначают антибиотики (стрептомицин, левомицетин, неомицин, тетрациклин), препараты сурьмы (солюсурьмин), вакцинотерапию. Вакцину готовят из капсульных штаммов путем нагревания.
Род Klebsiella, относящийся к семейству энтеробактерий, объединяет капсульные бактерии, вызывающие различные заболевания: пневмонию и гнойно-воспалительные процессы - К. pneumoniae, риносклерому - К. rinoscleromatis, озену (зловонный насморк) - К. ozaenae.
Морфология . Клебсиеллы - короткие толстые палочки, размером 0,6-6,0 × 0,3-1,5 мкм с закругленными концами. Неподвижны. Образуют капсулу. В мазках располагаются одиночно, попарно или короткими цепочками.
Культивирование . Клебсиеллы - факультативные анаэробы. Хорошо растут на простых питательных средах при 35-37° С. На плотных средах образуют куполообразные слизистые колонии, на бульоне - интенсивное помутнение.
Ферментативные свойства . Ферментируют лактозу, расщепляют глюкозу и маннит с образованием кислоты и газа, разлагают мочевину, не образуют индола и сероводорода.
Токсинообразование . Обладают эндотоксином. Вирулентность их зависит от наличия капсулы - бескапсульные формы менее вирулентны.
Антигенная структура . Клебсиеллы содержат капсульые К- и соматические О-антигены. Сочетание этих нтигенов обусловливает принадлежность культур к определенным сероварам. В настоящее время известно 80 К- и 11 О-антигенов.
Устойчивость к факторам окружающей среды . Благодаря наличию капсулы клебсиеллы устойчивы и длительно сохраняются в почве, воде, на предметах обихода. При 65° С погибают в течение часа. Чувствительны к действию растворов дезинфицирующих веществ (хлорамина, фенола и др.). Отмечается высокая резистентность к антибиотикам.
Восприимчивость животных . В естественных условиях вызывают заболевания различных животных: коров, свиней, лошадей (мастит, пневмонию, септицемию).
Источники инфекции . При экзогенной инфекции источником инфекции являются больной человек и здоровый носитель.
Пути передачи . Контактно-бытовой (грязные руки, предметы обихода). В детских учреждениях и больницах инфекция часто передается через белье, инструментарий, игрушки.
Патогенез . Клебсиеллезы развиваются большей частью как вторичная инфекция у лиц с пониженной сопротивляемостью и у новорожденных (недоношенных). Бактерии из верхних дыхательных путей и кишечника проникают в различные органы и кровь и вызывают гнойно-воспалительные процессы, сепсис, менингит.
Иммунитет . Послеинфекционный иммунитет непродолжителен и развивается только в отношении одного определенного возбудителя (серовара).
Профилактика . Соблюдение санитарно-гигиенического режима в родильных домах, больницах, детских учреждениях. Специфическая профилактика отсутствует.
Лечение затруднено в связи с высокой устойчивостью клебсиелл к антибиотикам. Наиболее эффективно применение гентамицина, канамицина, иногда ампициллина.
Микробиологическое исследование
Цель исследования: выделение и идентификация клебсиелл из патологического материала и объектов внешней среды.
Материал для исследования
1. Мокрота.
2. Слизь из зева, гной из уха, отделяемое раны.
3. Испражнения.
4. Смывы с предметов окружающей среды.
Основные методы исследования
1. Микробиологический.
2. Серологический.
Ход исследования
Второй день исследования
Делают мазки, окрашивают по Граму. При наличии амотрицательных палочек отбирают слизистые колонии (4-5) и пересевают их на скошенный агар и среду Ворфель - Фергюсона (для выделения чистой культуры) и на комбинированную среду Рассела (или среду с мочевиной) для определения ферментативных свойств и подвижности. В пробирку под пробку опускают полоски бумаги, пропитанные реактивами для определения индолообразования и сероводорода.
Делают высев из глюкозного агара на плотные питательные среды для проведения (если понадобится) дополнительного исследования.
Третий день исследования
При росте неподвижной культуры, ферментирующей лактозу, глюкозу, мочевину, не образующей индола и сероводорода, делают посев на среды с цитратом и малонатом и мазки для определения наличия капсулы. При наличии капсулы ставят реакцию агглютинации на стекле с агглютинирующими К-сыворотками. Просматривают дополнительный посев на плотные питательные среды. Можно выдать ориентировочный ответ: "Выделены клебсиеллы".
КЛЕБСИЕЛЛЫ (КАПСУЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ)
Среди патогенных микроорганизмов встречается группа бактерий, для которой характерно образование капсулы не только в организме больного человека, но и на искусственных питательных средах. Поэтому эти бактерии получили название капсульных. К ним относится возбудитель воспаления легких - диплобактерии Фридлендера (Klebsiella pneumoniae), палочка риносклеромы (Klebsiella rhinoscleromatis) и палочка озены (Klebsiella ozaenae).
Морфология и тинкториальные свойства. Все микробы этой группы представляют собой небольшие палочки с закругленными концами от 1 до 3 мк в длину и от 0,5 до 0,8 мк в толщину. Часто располагаются парами. Спор не образуют, жгутиков не имеют. Снабжены слизистой капсулой (см. рис. 19 на вклейке). Легко воспринимают анилиновые краски, грамотрицательны.
Культуральные и биохимические свойства. На обычных питательных средах капсульные бактерии дают пышный рост. Оптимальная температура роста 37°. На агаровых пластинках образуются круглые слизистые серовато-белые колонии. По Эльберту, палочки озены в юной колонии (3-4 часового роста) располагаются концентрически, бактерии пневмонии петлеобразно. На скошенном агаре образуют серовато-белый налет слизистого характера. В бульоне вызывают диффузный рост с образованием «а дне тягучего слизистого осадка, а на поверхности - слизистой пленки. Желатину не разжижают. Сбраживают углеводы непостоянно с образованием кислоты, а иногда и газа. Палочка риносклеромы не ферментирует лактозу (Эльберт).
Патогенность для животных и человека. К капсульным бактериям чувствительны белые мыши, которые погибают спустя 24-48 часов после парентерального введения им культуры.
Клебсиеллы пневмонии вызывают у человека воспаление легких, гнойные и фибринозные плевриты, перикардит, менингит, гайморит и пр. Палочка риносклеромы поражает верхние дыхательные пути. Болезнь выражается в образовании хронических инфильтратов хрящевой консистенции в коже и слизистой носа, на слизистых оболочках глотки и гортани. Для пораженной ткани при риносклероме характерно наличие крупных клеток Микулича с заключенными в них возбудителями.
Палочка озены вызывает воспаление слизистой оболочки носа с выделением вязкого слизисто-гнойного секрета, который быстро засыхает с образованием корочек.
Микробиологическая диагностика. Лабораторная диагностика заболеваний, вызванных капсульными бактериями, основывается на бактериоскопическом, бактериологическом и экспериментальном исследовании патологического материала (мокрота при пневмонии, слизь из носа при озене, кусочки тканей при риносклероме). Для диагностики риносклеромы используют реакцию связывания комплемента.
Эпидемиология капсульных инфекций изучена мало. Специфической профилактики не существует. Лечение осуществляется применением стрептомицина, тетрациклина, неомицина и препаратов сурьмы.
Внимание, только СЕГОДНЯ!
Страница 45 из 91
КЛЕБСИЕЛЛЫ (КАПСУЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ)
Среди патогенных микроорганизмов встречается группа бактерий, для которой характерно образование капсулы не только в организме больного человека, но и на искусственных питательных средах. Поэтому эти бактерии получили название капсульных. К ним относится возбудитель воспаления легких - диплобактерии Фридлендера (Klebsiella pneumoniae), палочка риносклеромы (Klebsiella rhinoscleromatis) и палочка озены (Klebsiella ozaenae).
Морфология и тинкториальные свойства. Все микробы этой группы представляют собой небольшие палочки с закругленными концами от 1 до 3 мк в длину и от 0,5 до 0,8 мк в толщину. Часто располагаются парами. Спор не образуют, жгутиков не имеют. Снабжены слизистой капсулой (см. рис. 19 на вклейке). Легко воспринимают анилиновые краски, грамотрицательны.
Культуральные и биохимические свойства. На обычных питательных средах капсульные бактерии дают пышный рост. Оптимальная температура роста 37°. На агаровых пластинках образуются круглые слизистые серовато-белые колонии. По Эльберту, палочки озены в юной колонии (3-4 часового роста) располагаются концентрически, бактерии пневмонии петлеобразно. На скошенном агаре образуют серовато-белый налет слизистого характера. В бульоне вызывают диффузный рост с образованием «а дне тягучего слизистого осадка, а на поверхности - слизистой пленки. Желатину не разжижают. Сбраживают углеводы непостоянно с образованием кислоты, а иногда и газа. Палочка риносклеромы не ферментирует лактозу (Эльберт).
Патогенность для животных и человека. К капсульным бактериям чувствительны белые мыши, которые погибают спустя 24-48 часов после парентерального введения им культуры.
Клебсиеллы пневмонии вызывают у человека воспаление легких, гнойные и фибринозные плевриты, перикардит, менингит, гайморит и пр. Палочка риносклеромы поражает верхние дыхательные пути. Болезнь выражается в образовании хронических инфильтратов хрящевой консистенции в коже и слизистой носа, на слизистых оболочках глотки и гортани. Для пораженной ткани при риносклероме характерно наличие крупных клеток Микулича с заключенными в них возбудителями.
Палочка озены вызывает воспаление слизистой оболочки носа с выделением вязкого слизисто-гнойного секрета, который быстро засыхает с образованием корочек.
Микробиологическая диагностика. Лабораторная диагностика заболеваний, вызванных капсульными бактериями, основывается на бактериоскопическом, бактериологическом и экспериментальном исследовании патологического материала (мокрота при пневмонии, слизь из носа при озене, кусочки тканей при риносклероме). Для диагностики риносклеромы используют реакцию связывания комплемента.
Эпидемиология капсульных инфекций изучена мало. Специфической профилактики не существует. Лечение осуществляется применением стрептомицина, тетрациклина, неомицина и препаратов сурьмы.